国内刊号:42-1678/R
国际刊号:1672-0741
发布日期:
作者:周晓华,李合
单位:海南医学院第一附属医院普通外科,海口 570102
关键词:结直肠癌, 盐酸石蒜碱, circSEPT9, miR-654-5p, 增殖, 凋亡,
基金:海南省医药卫生科技项目(No.2001320271A2007)
摘要:目的 探讨盐酸石蒜碱(lycolinehydrochloride,LH)对人结直肠癌细胞 SW620细胞增殖、凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 不同剂量的 LH 处理SW620细胞(LH-L组、LH-M 组、LH-H 组),同时将正常培养的 SW620细胞记为 Con组;实验分组:si-NC 组、si-circSEPT9组、LH+pcDNA-circSEPT9组、LH+anti-miR-654-5p组;利用 MTT法、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成及凋亡;实时荧光定量 PCR(qRT-PCR)法检测circSEPT9、miR-654-5p的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circSEPT9与 miR-654-5p的靶向关系;Westernblot法检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleavedCaspase-3)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9(cleavedCaspase-9)蛋白表达量。结果 与 Con组比较,LH-L组、LH-M 组、LH-H 组细胞增殖抑制率、miR-654-5p的表达量、细胞凋亡率和cleavedCaspase-3、cleavedCaspase-9蛋白水平升高(均P<0.05),细胞克隆形成数减少(均 P<0.05),circSEPT9的表达量降低(均P<0.05),且呈剂量依赖性;circSEPT9可靶向调控 miR-654-5p的表达;与si-NC 组比较,sicircSEPT9组 miR-654-5p的表达量、细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和cleavedCaspase-3、cleavedCaspase-9蛋白水平升高(均P<0.05),细胞克隆形成数减少(均P<0.05);与 LH 组比较,LH+pcDNA-circSEPT9组、LH+anti-miR-654-5p组miR-654-5p的表达量、细胞 增 殖 抑 制 率、细 胞 凋 亡 率 和 cleavedCaspase-3、cleavedCaspase-9 蛋 白 水 平 降 低 (均 P<0.05),细胞克隆形成数增多(均P<0.05)。结论 盐酸石蒜碱可通过调控circSEPT9/miR-654-5p表达而抑制结直肠癌细胞增殖、克隆形成及诱导细胞凋亡。
来源:2022年第1期
《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部