华中科技大学学报(医学版)

作者：陈艳,王梓璇,冀彩丽,华梦晴,宋传旺

单位：蚌埠医学院检验医学院免疫学教研室,慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠 233030

关键词：热休克蛋白70, 急性肺损伤, 肺泡上皮细胞, 吞噬功能,

基金：安徽高校自然科学研究重大项目(No.KJ2020ZD49);蚌埠医学院“512人才培育计划”项目(No.by51201103);蚌埠医学院科研创新团队项目(No.BYKC201902);蚌埠医学院自然科学重点项目(No.2020byzd024)

目的 探讨热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)对急性肺损伤(acutelunginjury,ALI)小鼠发病的影响及其相关机制。方法 构建 ALI模型小鼠,免疫印迹法检测肺组织中 HSP70的表达情况,酶联免疫法检测支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolarlavagefluid,BALF)中 HSP70的分泌情况。ALI小鼠经鼻滴 HSP70抗体(anti-HSP70)后,抽取 BALF,检测其中肿瘤坏死因子α(tumornecrosisfactorα,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin6,IL-6)、白细胞介素1β(interleukin1β,IL-1β)和蛋白的含量,并计数中性粒细胞的数目;获取肺组织进行苏木精-伊红染色并计算肺湿/干重比。以 LPS刺激小鼠肺泡上皮细胞株 MLE-12细胞,酶联免疫法检测培养上清液中 TNF-α和IL-1β的含量。不同浓度的 HSP70(10~500ng/mL)刺激小鼠肺泡上皮细胞(alveolarepithelialcells,AECs)后,流式细胞术检测 AEC 吞噬凋亡细胞的情况。结果 与正常对照组小鼠相比,ALI小鼠肺组织中 HSP70的表达及 BALF中 HSP70的分泌均增加(均 P<0.05)。与 ALI组小鼠相比,经anti-HSP70鼻滴治疗后的 ALI小鼠,其 BALF中 TNF-α、IL-6、IL-1β和蛋白的含量均降低(均P<0.05),中性粒细胞数目减少(P<0.05);其肺组织中炎性细胞浸润减少,肺湿/干重比降低(P<0.05)。与LPS刺激组相比,anti-HSP70+LPS组 MLE-12细胞培养上清液中 TNF-α和IL-1β含量均减少(均 P<0.05)。与未刺激组相比,10~500ng/mL HSP70刺激组 MLE-12细胞吞噬凋亡细胞百分率明显降低,其中以200ng/mL HSP70刺激组降低最为明显(P<0.01);与未刺激组相比,200ng/mL HSP70刺激的小鼠原代肺泡上皮细胞吞噬率降低(P<0.01)。结论 HSP70促进 ALI小鼠肺部炎症反应,这一效应可能与 HSP70降低肺泡上皮细胞吞噬凋亡细胞的功能相关。

来源：2022年第2期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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