华中科技大学学报(医学版)

作者：房佩佩,付晓燕,吴沛恩,吴圆圆,张倩,张凯铖,彭美玉,梁淑娟

单位：潍坊医学院免疫学教研室,山东省高校免疫学重点实验室,潍坊 261053

关键词：肝癌, 白细胞介素1β, 血管内皮细胞, 粘附分子, 信号通路,

基金：国家自然科学基金资助项目(No.81972695)

摘要:目的 探讨肿瘤来源的白细胞介素1β(IL-1β)对血管内皮细胞粘附肝癌细胞功能的影响及分子机制。方法慢病毒转染建立稳定表达IL-1β(HepG2/IL-1β)和 GFP(HepG2/GFP)的 HepG2细胞,ELISA 法测定细胞培养上清中IL-1β浓度,以含IL-1β的 HepG2细胞条件培养液(IL-1β-CM)作为肿瘤源性IL-1β来源,以 GFP慢病毒感染的 HepG2细胞条件性培养液(Ctrl-CM)为对照。以含10ng/mLIL-1β的IL-1β-CM 刺激人脐静脉内皮细胞(HUVECs+IL-1βCM),观察其对 HepG2/IL-1β、HepG2/GFP细胞的粘附能力,并与 HUVECs+Ctrl-CM 比较。qRT-PCR 法检测血管内皮细胞中 E-选择素(CD62E)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1,即 CD54)、血管细胞粘附分子-1(VCAM-1,即 CD106)mRNA表达水平。流式细胞术检测 CD62E、CD54蛋白表达水平。Westernblot分析 HUVECs中IL-1β-CM 激活的信号通路,以及靶向阻断信号通路对粘附分子表达和细胞间粘附作用的影响。结果 肿瘤源性IL-1β显著促进了 HUVECs对HepG2细胞的粘附作用,明显上调 HUVECs细胞中 CD62E、CD54mRNA 表达水平。CD62E蛋白在IL-1β刺激后4h短暂升高,CD54蛋白呈现为持续升高模式,自刺激 4h起 维 持 至 24h。IL-1β激 活 血 管 内 皮 细 胞 中 NF-κBp65、p38MAPK 信号通路,其中 NF-κBp65位于上游且对p38MAPK 活化具有控制作用。靶向阻断 NF-κBp65通路显著下调了HUVECs表面 CD62E、CD54表达和对 HepG2细胞的粘附效应。结论 肿瘤源性IL-1β通过激活 NF-κBp65为主的信号机制调控血管内皮细胞 CD62E和 CD54表达,促进血管内皮细胞对肝癌细胞的粘附作用,进而在肝癌细胞的浸润转移中发挥作用。

来源：2022年第3期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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