华中科技大学学报(医学版)

作者：冀彩丽,王梓璇,李帆,庞洪源,苏浩宇,华梦晴,宋传旺

单位：蚌埠医学院 1检验医学院免疫学教研室,2慢性疾病免疫学基础与临床安徽省重点实验室,蚌埠 2330303蚌埠医学院口腔医学院,蚌埠 233030

关键词：急性肺损伤,肺泡巨噬细胞,肿瘤坏死因子-α,MARCO 受体,吞噬作用,

基金：安徽高校自然科学研究项目 (No.KJ2020ZD49,No.KJ2021A0717);蚌埠医学院“512人才培育计划”项目(No.by51201103);蚌埠医学院科研创新团队项目(No.BYKC201902);蚌埠医学院自然科学重点项目(No.2020byzd024);蚌埠医学院省重点科研平台开放课题(No.KLICD-2022-D2)

摘要:目的 探讨 Yes相关蛋白(Yes-associatedprotein,YAP)对肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophages,AMs)吞噬功能的影响及相关机制。方法 通过鼻滴脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)构建急性肺损伤(ALI)小鼠模型,24h后经支气管肺泡灌洗获取原代 AMs,采用 Westernblot检测原代 AMs中 YAP的表达;使用200ng/mL的 TNF-α刺激肺泡巨噬细胞株 MH-S,24h后检测 YAP蛋白表达情况。MH-S细胞经 YAPsiRNA 干扰表达或经 Verteporfin抑制 YAP活性48h后再与FITC-E.coli共孵育1h,流式细胞术检测 MH-S细胞吞噬率变化。MH-S细胞经 MARCO 阻断抗体(MARCOAb)作用6h后,检测其吞噬E.coli能力的变化。YAPsiRNA 干扰 MH-S细胞 YAP表达48h后,检测 MARCO 受体的表达情况。结果 与对照组相比,ALI小鼠 AMs总蛋白(P<0.05)和胞质蛋白(P<0.01)中 YAP的表达均下降;TNF-α刺激后的 MH-S细胞,其总蛋白和胞质蛋白中 YAP蛋白水平均下降(均 P<0.05)。与干扰对照组(ScsiRNA组)相比,YAPsiRNA 组 MH-S细胞吞噬能力降低(P<0.01);与对照组相比,YAP活性抑制组 MH-S细胞的吞噬率明显下降(P<0.01)。用 MARCO Ab阻断 MARCO 受体后,MH-S吞噬率降低(P<0.01)。与 ScsiRNA 组相比,YAPsiRNA 组 MH-S细胞 MARCO 受体表达降低(P<0.01)。结论 ALI小鼠 AMs中 YAP蛋白表达下降,YAP的下调可以导致 AMs表面 MARCO 受体表达降低和吞噬E.coli能力减弱。

来源：2022年第5期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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