华中科技大学学报(医学版)

作者：黄燕,杨艳清,万睿,周进飞,张层层,刘睿,许其军,张名,李慧娟

单位：武汉市第三医院 1整形外科 4皮肤科,武汉 4300602襄阳市伊莱美医疗美容门诊部美容皮肤科,襄阳 4410993潜江市皮肤病防治院医学美容科,潜江 433199

关键词：细胞衰老, H2O2, miR-181a-5p, 自噬, 凋亡,

基金：武汉市医学科研项目(No.WX20Q03)

摘要:目的 观察 miR-181a-5p在 H2O2诱导大鼠皮肤成纤维样细胞衰老过程中的表达变化,并探讨其表达水平对细胞自噬和凋亡的影响。方法 采用200μmol/LH2O2诱导大鼠皮肤成纤维样 RS1细胞6h,构建细胞衰老模型。将细胞分为5组:H2O2处理组、mimic-NC 组、mimic组、inhibitor-NC 组和inhibitor组,采用脂质体转染技术将 miR-181a-5pmimic、inhibitor等转染入相应的细胞中。MTT 法检测细胞增殖活性;qPCR 检测细胞 miR-181a-5p表达水平。利用流式细胞术检测细胞凋亡;利用吖啶橙染色观察细胞自噬水平;采用 Westernblot检测细胞 LC3B、p62、Beclin-1、自噬相关基因5(autophagyrelated5,ATG5)蛋白表达水平。结果 与正常 RS1细胞比较,H2O2诱导后的 RS1细胞增殖活性显著降低(P<0.05),而 miR-181a-5p表达水平显著升高(P<0.05)。与 H2O2处理组比较,mimic组 RS1细胞排列紊乱,细胞轮廓不清晰,碎片较多,凋亡率显著升高(P<0.05),自噬水平降低,Beclin-1和 ATG5表达显著降低(均 P<0.05);inhibitor组 RS1细胞轮廓清晰,过度伸展、空泡化的细胞减少,凋亡率显著降低(P<0.05),自噬水平升高,Beclin-1和ATG5表达显著升高(均P<0.05)。结论 H2O2诱导大鼠皮肤成纤维样细胞 miR-181a-5p表达增加,且上调 miR-181a5p表达,可抑制细胞自噬、促进细胞凋亡。

来源：2022年第6期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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