华中科技大学学报(医学版)

作者：张璐瑶,朱伟,李瑛傑,张博燃,曾凯,魏蔚,马净植,杨焰

单位：1华中科技大学同济医学院附属同济医院口腔医学中心,武汉 4300302四川省绵阳市中医医院口腔科,绵阳 6210533武汉市中医医院口腔科,武汉 4300104华中科技大学协和深圳医院口腔科,深圳 5180525湖南中医药大学口腔医学院(长沙市口腔医院),长沙 410023

关键词：二喹啉甲酸法(BCA)法, 多肽, 浓度测定, 个性化标准曲线

基金：国家自然科学基金资助项目(No.81700961,No.81873714)

摘要：目的 比较研究实验室测定多肽浓度的消光系数法与二喹啉甲酸法(bicinchoninic acid, BCA)的精密度。方法 将牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)与固相合成环肽CYE(NH2-CYENLRSTC-COOH)、CLP(NH2-CLPLWYPSC-COOH)及CHY(NH2-CHYPTYSKC-COOH)溶液梯度稀释后分别使用消光系数法和BCA法进行吸光度测定，通过消光系数公式或标准曲线方程式计算相应浓度值，比较浓度计算值与理论值之间的差异，并计算测定方法的精密度。结果 消光系数法的浓度计算值与理论值之间差异无统计学意义(P>0.05)。BCA法中，以BSA作为标准品得到的多肽浓度计算值与理论值之间有显著差异(P<0.05);以待测多肽自身为标准品求得的多肽浓度计算值与理论值之间无明显差异(P>0.05);以与待测多肽长度相同、分子量相近的多肽绘制个性化标准曲线求得的多肽浓度计算值与理论值之间存在统计学差异(P<0.05),但求得的浓度计算值相比BSA标准曲线的浓度计算值更接近理论值(P<0.05)。各方法的精密度之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 消光系数法推荐用于含有色氨酸和酪氨酸的多肽；当标准品在结构、疏水性等方面的性质越接近待测物，使用个性化标准曲线的BCA法得到的浓度计算值越准确，可用于多肽浓度的快速半定量测定。

来源：2023年第2期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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