华中科技大学学报(医学版)

作者：徐建群,周利君,程津津,方思,王红娟,郭红荣,戴芹

单位：武汉市第三医院呼吸内科,武汉 430071

关键词：肺癌, 顺铂, 甲基转移酶样3, N6-甲基腺苷, DNA 损伤,

基金：武汉市卫生健康委员会重点项目(No.WX20B04)

摘要:目的 基于顺铂诱导肺癌细胞 DNA 损伤细胞模型,探讨甲基转移酶样3(methyltransferase-like3,METTL3)介导的 N6-甲基腺苷(N6-methyladenosine,m6A)修饰β-catenin在肺癌中的作用机制。方法 通过顺铂诱导,建立 A549细胞 DNA 损伤模型,再接受合成 METTL3siRNA 和siRNA 空载质粒(NC)转染。将细胞分成对照组、顺铂诱导组、顺铂诱导+siRNA 组、顺铂诱导+NC 组,CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,qRT-PCR 和Westernblot检测 METTL3mRNA 和 蛋 白 表 达,Westernblot检 测 各 组 细 胞 中 β-catenin、H2AX、ERCC1、NDRG1 和ATM 的蛋白表达,m6ARNA 甲基化定量试剂盒测定 RNA 中 m6A 的水平。结果 成功转染 METTL3siRNA 后,A549细胞中 METTL3mRNA 表达降低(P<0.01)。与对照组相比,顺铂诱导组细胞增殖能力下降(P<0.01),凋亡率上升(P<0.01),细胞周期 G0~G1期延长,S期和 G2~M 期均缩短(均 P<0.01),METTL3mRNA 和蛋白表达水平下调(均P<0.01),H2AX、ERCC1、NDRG1蛋白表达上升(均 P<0.01),ATM 和β-catenin蛋白表达下降(均 P<0.01),m6A 水平显著下调(P<0.01);与顺铂诱导组相比,顺铂诱导+siRNA 组上述趋势更加显著;而顺铂诱导+NC 组细胞与其差异无统计学意义。结论 METTL3敲低通过 m6A 修饰β-catenin抑制顺铂诱导肺癌细胞 DNA 损伤的修复。

来源：2023年第4期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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