华中科技大学学报(医学版)

作者：廖薇薇,傅祥炜,温必盛,杨维忠

单位：海南医学院第二附属医院1消化内镜科2普通外科,海口 570311

关键词：lncRNACASC11, miR-146a-3p, 结肠癌, 增殖, 侵袭,

基金：海南省卫生健康行业科研项目(No.21A200160)

摘要:目的 探究长链非编码RNA癌症易感候选基因11(lncRNACASC11)通过靶向调控miR-146a-3p对结肠癌细胞增殖及侵袭的影响及其可能的作用机制。方法 通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测人结肠黏膜上皮细胞、人结肠癌组织源细胞及3种不同的人结肠癌细胞系HCT116、SW620及SW480中lncRNACASC11、miR-146a-3p的表达量,同时体外培养SW620细胞系并分为对照组(未处理组)、lncRNACASC11siRNA组、lncRNACASC11siRNA阴性对照组及lncRNACASC11siRNA+miR-146a-3pinhibitor共转染组,分别予以相应处理后,用MTT法及EdU染色检测各组SW620细胞增殖活性;Transwell小室侵袭实验检测各组SW620细胞侵袭能力;免疫荧光染色(ICF)检测各组SW620细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达情况;qRT-PCR及蛋白免疫印迹检测各组SW620细胞miR-146a-3p及上皮间质转化标志蛋白Vimentin、E-cadherinmRNA 及蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因实验检测SW620细胞中lncRNA CASC11对miR-146a-3p的靶向调控作用;qRT-PCR和蛋白免疫印迹法检测SW620细胞中lncRNACASC11对c-Met表达水平的调控作用。结果 与人结肠黏膜上皮细胞相比,HCT116、SW480、SW620中lncRNACASC11表达明显升高(均P<0.05),而miR-146a-3p表达明显降低(均P<0.05)。与对照组相比,lncRNACASC11siRNA组细胞活性、EdU阳性率、侵袭细胞数及VimentinmRNA表达降低(均P<0.05),细胞Bax/Bcl-2比值、miR-146a-3p及E-cadherinmRNA表达均升高(均P<0.05);lncRNACASC11siRNA阴性对照组与对照组相比各检测结果无明显差异(均P>0.05);与lncRNACASC11siRNA组相比,共转染组细胞活力、EdU阳性率、侵袭细胞数、VimentinmRNA表达升高(均P<0.05),细胞Bax/Bcl-2比值、miR-146a-3p及E-cadherinmRNA表达均降低(均P<0.05)。在SW620细胞中,lncRNACASC11可靶向下调miR-146a-3p的表达,上调下游c-Met基因的表达。结论 lncRNACASC11通过靶向下调miR-146a-3p介导结肠癌细胞的生物学行为,敲低lncRNACASC11基因可促进miR-146a-3p表达,抑制结肠癌细胞增殖及侵袭。

来源：2023年第6期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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