华中科技大学学报(医学版)

作者：王雪梅,黄纯兰,周铁军,李玉娇,魏梦宇,陈燕,陈晓敏,王万玥

单位：西南医科大学附属医院1血液内科2干细胞实验室3病理科,泸州 646099

关键词：过氧化物酶体增殖激活受体γ, 人骨髓基质细胞, 骨髓抑制小鼠, 造血功能, 成骨/成脂分化,

基金：四川省科技计划项目(No.2020YJ0339);四川省泸州市科技计划项目(No.2019-SYF-36)

摘要:目的 观察过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisomeproliferatoractivatedreceptor-gamma,PPARγ)基因沉默的人骨髓基质细胞HS-5对骨髓抑制小鼠造血功能的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法 用X射线进行全身照射构建骨髓抑制小鼠模型,造模后2h,将小鼠随机分为3组,分别为实验组(尾静脉注射PPARγRNAi干扰的HS5细胞)、对照组(尾静脉注射未行PPARγRNAi干扰的HS-5细胞)、空白组(尾静脉注射等量的生理盐水),每组5只。各组于放疗前、放疗后24h、放疗后1周、放疗后2周进行外周血常规检测。对HS-5细胞在体外进行成骨、成脂诱导,分为实验组(PPARγRNAi干扰的HS-5细胞)、对照组(未干扰PPARγ的HS-5细胞)、空白组(未行成骨/成脂诱导分化的HS-5细胞),观察成骨/成脂染色情况。采用CCK-8实验检测PPARγ基因沉默的 HS-5细胞对小鼠骨髓造血干细胞(hemopoieticstemcell,HSC)增殖的影响,分为实验组(PPARγRNAi干扰的 HS-5细胞经成骨诱导分化3d后,与小鼠HSC共培养)、阳性对照组(50μmol/LPPARγ抑制剂处理的HS-5细胞经成骨诱导分化3d后,与小鼠HSC共培养)、阴性对照组(未干扰PPARγ的HS-5细胞经成骨诱导分化3d后,与小鼠HSC共培养)、空白组(小鼠HSC单独培养,不与HS-5细胞共培养)。结果 放疗后,各组小鼠血常规指标均呈先降低后升高趋势,放疗后1周,三组小鼠血小板、白细胞水平差异显著,且实验组>对照组>空白组(均P<0.05);放疗后2周,三组小鼠脂肪空泡面积百分比差异显著,且实验组<对照组<空白组(均P<0.05),经Pearson相关分析显示,血常规各指标与血清PPARγ表达水平呈负相关(均P <0.05),与脂肪空泡面积百分比呈负相关(均P<0.05)。在体外成骨/成脂诱导分化后,实验组与对照组相比,橙红色的细胞比例明显降低,红色钙结节比例明显增高;成骨分化诱导3d后,实验组、阳性对照组、阴性对照组人骨髓基质细胞均与小鼠HSC细胞进行共培养,空白组则单纯培养HSC细胞,结果显示共培养24、48、72h后,实验组、阳性对照组小鼠HSC细胞增殖水平均高于阴性对照组和空白组(均P<0.05)。结论 PPARγ基因沉默的HS-5植入骨髓抑制小鼠后有助于小鼠造血功能增强。PPARγ基因被干扰沉默后,可增强HS-5细胞的成骨分化能力,减弱HS-5细胞的成脂分化能力,而成骨分化诱导的HS-5细胞能进一步增强小鼠HSC的增殖能力。

来源：2024年第1期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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