华中科技大学学报(医学版)

作者：钱旭东,李国芸,卜一,王红梅,张硕,窦志杰

单位：承德医学院附属医院 1神经内科 2呼吸内科,承德 067000

关键词：线粒体凋亡, 氧糖剥夺/复氧模型, PC12细胞, 线粒体裂变因子 ,

基金：河北省医学科学研究课题(No.20220005)

摘要:目的 探究线粒体裂变因子(mitochondrialfissionfactor,MFF)在氧糖剥夺/复氧(oxygenglucosedeprivation/ re-oxygenation,OGD/R)处理的PC12细胞中的表达及其对线粒体凋亡通路的影响。方法 选用PC12细胞系构建体外缺血性神经元损伤模型。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和蛋白质免疫印迹(Westernblot)实验明确 MFFmRNA和蛋白在不同处理时间点的表达情况。通过RNA干扰技术沉默MFF基因表达,利用qRT-PCR、Westernblot检测MFFmRNA和蛋白的表达情况;CCK-8检测沉默MFF对OGD/R处理的PC12细胞活力的影响;JC-1和试剂盒检测线粒体膜电位、腺苷三磷酸(adenosinetriphosphate,ATP)和活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)水平变化;Westernblot检测细胞色素C(cytochromeC,Cyt-C)、Bax和Bcl2的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Caspase-3和Caspase-9的活性变化。结果 MFF在体外OGD/R诱导的PC12细胞中的mRNA和蛋白含量明显升高。MFF沉默增强了OGD/R损伤后PC12细胞的活力,降低了细胞凋亡率,并促进Bcl2和抑制Bax蛋白的表达。敲低MFF明显提高了OGD/R处理后PC12细胞的线粒体膜电位,促进ATP合成,降低ROS含量,抑制线粒体细胞色素C释放和Caspase-3和Caspase-9的活性。结论 沉默MFF基因显著提高了OGD/R处理后PC12细胞的存活率,改善了线粒体功能。

来源：2024年第2期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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