华中科技大学学报(医学版)

作者：谭苗,钱琛,向可,段钟琪,万芳,刘莹

单位：湖北医药学院1基础医学院2武当特色中药研究湖北省重点实验室,十堰 4420003湖北文理学院附属谷城医院,襄阳 441700

关键词：结直肠癌, 乙氧基二氢血根碱, 表皮生长因子受体, 侵袭, 迁移, 凋亡,

基金：国家自然科学基金资助项目(No.82072928);湖北省卫生健康委指导性项目(No.WJ2023F079);湖北医药学院研究生科技创新项目(No.YC2022032); 2022年大学生创新创业训练计划项目(No.202210929007);2023年大学生创新创业训练计划项目(No.S202310929001)

摘要:目的 探讨乙氧基二氢血根碱(ethoxydihydrosanguinarine,ESG)对结直肠癌细胞的抑制及具体分子机制。方法 选用结直肠癌细胞系RKO和HRT-18。实验分为空白对照组和加药组(1.0、1.5、2.0μmol/LESG)。通过CCK-8法、实时无标记细胞分析技术(realtimecellularanalysis,RTCA)及克隆形成实验检测ESG对细胞增殖能力的影响;以流式细胞术、DAPI染色、JC-1线粒体膜电位和活性氧检测试剂盒检测ESG对细胞凋亡的影响;通过高内涵成像分析技术及Transwell侵袭实验检测ESG对细胞侵袭、迁移的影响;Westernblot检测细胞凋亡及侵袭、迁移相关蛋白的表达,表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)以及下游 Akt/ERK信号通路蛋白的表达及磷酸化水平;通过过表达EGFR和敲低EGFR探讨EGFR在ESG诱导结直肠癌细胞凋亡、抑制细胞增殖及侵袭迁移过程中的作用;通过分子对接、靶点稳定性药物亲和反应实验以及微量热泳动实验检测ESG与EGFR的直接结合作用。结果 ESG显著抑制结直肠癌细胞的增殖及克隆形成能力;ESG诱导结直肠癌细胞发生线粒体途径凋亡并抑制其侵袭、迁移能力;ESG直接结合EGFR的激酶活性区而抑制其活性,进而下调其下游与肿瘤恶性进展相关的信号分子Akt、ERK的磷酸化水平。结论 ESG靶向结合并抑制EGFR,进而通过其下游Akt/ERK信号通路抑制结直肠癌细胞侵袭、迁移并诱导线粒体途径的细胞凋亡,有望成为靶向EGFR治疗结直肠癌的新型靶向药物。

来源：2024年第3期

《华中科技大学学报(医学版)》期刊编辑部

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